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Revista de Salud Animal
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  This is an Open Access Journal Open Access journal
ISSN (Print) 0253-570X - ISSN (Online) 2224-4700
Published by SciELO Homepage  [688 journals]
  • I Scientific Conference: One Health, One Well-being for all: Challenges
           for Medical Sciences

    • Abstract: RESUMEN La lengua azul (LA) es una enfermedad viral que afecta a los rumiantes domésticos y salvajes. El agente etiológico de esta enfermedad es el virus de la lengua azul (VLA) que se transmite principalmente por vectores hematófagos del género Culicoides y tiene una distribución global. Cuba se encuentra en una zona de circulación endémica del virus y a pesar que desde el año 2007 se reporta a la Organización Mundial de la Sanidad Animal (OMSA) la presencia de bovinos seroreactores, no existen evidencias de manifestaciones clínicas de la enfermedad ni se ha aislado el virus. El objetivo del presente trabajo fue aislar e identificar el virus de la lengua azul a partir de la sangre de un ternero naturalmente infectado de la provincia Mayabeque en 2018. El virus fue aislado en huevos embrionados de pollo y en cultivo celular a partir de la sangre del ternero a los 21 días de edad que resultó positiva a la presencia de virus por un ensayo de reverso transcripción acoplada a la reacción en cadena de la polimerasa anidada (nRT-PCR). Los embriones inoculados mostraron mortalidad embrionaria, disminución de la talla, coloración rojiza y/o edema como indicativo de multiplicación viral. En el cultivo celular se observaron focos de células redondeadas y refráctiles. La identificación del virus se realizó por los ensayos de nRT-PCR, un Kit comercial de RT-PCR en tiempo real (rRT-PCR) y rRT-PCR basado en SYBR Green-I para la detección especifica del VLA.ABSTRACT Bluetongue (BT) is a viral disease that affects domestic and wild ruminants. The etiological agent of this disease is bluetongue virus (BTV) which is mostly transmitted by blood-borne vectors of the Culicoides genus and has a global distribution. Cuba is located in a zone of endemic circulation of the virus. Although the presence of bovine reactors has been reported to the World Organization for Animal Health (WOAH) since 2007, there is no evidence of clinical manifestations of the disease and the virus has not been isolated. This work aimed to isolate and identify bluetongue virus from the blood of a naturally infected calf from Mayabeque province in 2018. The virus was isolated in chicken embryonated eggs and in cell culture from the blood of the calf at 21 days of age, which tested positive for the presence of virus by a nested reverse transcription polymerase chain reaction assay (nRT-PCR). The inoculated embryos showed embryonic mortality, decreased size, reddish coloration and/or edema as indicative of viral multiplication. In cell culture, rounded and refractile cell foci were observed. Virus identification was performed by nRT-PCR assays, a commercial real-time RT-PCR kit (rRT-PCR) and rRT-PCR based on SYBR Green-I for specific detection of BTV.
       
  • Assessment of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) in organic milk from
           Tuxpan, Veracruz, Mexico

    • Abstract: RESUMEN La región de Tuxpan se caracteriza por una fuerte actividad petrolífera y la producción de alimentos ecológicos. Las actividades petroleras son fuente emisora de hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAPs) a la atmósfera y estos contaminan los suelos y los pastos de las granjas por deposición atmosférica. El objetivo de este estudio fue determinar el contenido de hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAPs) en leche cruda procedente de dos unidades de producción ecológica. Los análisis se realizaron mediante cromatografía de gases con detección por ionización de flama, de acuerdo con la metodología de la US EPA. Se detectó la presencia de HAPs en leche, donde la mediana de los mismos osciló entre 0.08-0.86 µg/kg de leche fresca (lf). Los compuestos fluoranteno (FLT), benzo(a)antraceno (BaA), benzo(k)fluoranteno (BkF) y benzo(a)pireno (BaP) presentaron una frecuencia de aparición por encima del 90%, existiendo un predominio de los HAPs de 4-6 anillos. No existió diferencia significativa (p<0.05) en el valor de la mediana del BaP y la suma de los 4HAPs (BaA, BaP, benzo(b)fluoranteno (BbF) y criseno (CHR)) en la leche de las dos granjas cercanas a la termoeléctrica y planta bombeadora de petróleo. El valor de la mediana del BaP se encontró por debajo de la normativa de la Unión Europea (1 µg/kg). Sin embargo, la suma de la mediana de los 4 HAPs presentaron valores de 1.58 µg/kg lf (granja A) y 1.99 µg/kg lf (granja B) por encima del valor permitido. Los resultados corroboraron que las producciones ecológicas también son susceptibles a la contaminación de HAPs. Este hallazgo alerta a los organismos reguladores la necesidad de establecer programas de monitoreos de estos contaminantes en leche orgánica con destino al consumo humano.ABSTRACT Tuxpan region is characterized by strong oil activity and organic food production. Oil activities are a source of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) emitted into the atmosphere, contaminating soils and farm pastures through atmospheric deposition.This study was aimed at determining the content of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) in raw milk from two organic production units. Analyses were carried out by gas chromatography with flame ionization detection, according to US EPA methodology. The presence of PAHs was detected in fresh milk, where mean concentrations of PAH ranged from 0.08-0.86 µg/kg of fresh milk (fm)..Fluoranthene (FLT), benzo(a)anthracene (BaA), benzo(k)fluoranthene (BkF) and benzo(a)pyrene (BaP) compounds presented a frequency of occurrence above 90 %, prevailing 4-6 ring PAHs. There was no significant difference (p<0.05) in the mean concentration of BaP and the sum of the 4 PAHs (BaA, BaP, benzo(b)fluoranthene (BbF) and chrysene (CHR)) in the milk from the two farms near the thermoelectric plant and the oil drilling plant. The mean concentration of BaP was below the EU regulation (1 µg/kg). However, the sum of the mean concentrations of the 4 PAHs presented values of 1.58 µg/kg fresh milk (fm) (farm A) and 1.99 µg/kg fm (farm B) above the permitted value.The results corroborated that organic productions are also susceptible to PAH contamination. This finding alerts regulatory agencies the need to establish monitoring programs for these contaminants in organic milk intended for human consumption.
       
  • First molecular evidence of Orf virus in Cuba

    • Abstract: RESUMEN Ectima contagioso (EC) es una enfermedad infecciosa de la piel y de las mucosas, altamente contagiosa y debilitante, que afecta principalmente a los ovinos y caprinos de todo el mundo. El agente etiológico de esta enfermedad es el virus Orf (ORFV). En el presente estudio se describe la primera evidencia molecular del ORFV infectando a dos cabras pertenecientes a una unidad de la provincia de Mayabeque en Cuba. Se realizó el diagnóstico clínico de la enfermedad y se confirmó la presencia del virus mediante PCR en punto final. Este estudio permitió la identificación molecular del ORFV por primera vez en Cuba y sienta las bases para la caracterización molecular del virus identificado.ABSTRACT Contagious ecthyma (CE) is a highly contagious and debilitating infectious disease of the skin and mucous membranes mainly affecting sheep and goats worldwide. The etiological agent of this disease is Orf virus (ORFV). The present study described the first molecular evidence of ORFV infecting two goats belonging to a unit in Mayabeque province in Cuba. The clinical diagnosis of the disease was carried out and the presence of the virus was confirmed by end-point PCR. This study allowed the molecular identification of ORFV for the first time in Cuba and established the basis for the molecular characterization of the virus identified.
       
  • Spatial distribution of antimicrobial resistance of extra-intestinal
           clinical Escherichia coli isolated from poultry farms in western provinces
           of Cuba

    • Abstract: ABSTRACT Antimicrobial resistance (AMR) is a worldwide concern and a threat to global public health. On the other hand, Escherichia coli has played a significant role in the evolution of AMR. The current study aimed to characterise the spatial pattern of AMR of extra-intestinal clinical E. coli isolated from commercial poultry in western provinces of Cuba. Data for the study covered January-2014 to December-2017. Trend analysis and exploratory description were carried out using R environment 4.0.4. ArcMap 10.4 was used for the spatial analysis by the Kernel Density Estimation method and visualisation map. Incremental trends in the frequency of resistance were observed during the study period. Kernel Density indicated that AMR was spatially distributed across the whole geographical region under study, although the highest density (high values) of AMR was located mainly in municipalities of Artemisa province. Areas of significantly higher and lower risk of AMR were identified in the Southeast and North of the region, respectively. Finally, the identification of the spatial distribution and relative risk surface of E. coli antimicrobial resistance from poultry farms in Cuba is a major step that contributes to optimise antimicrobial stewardship practices across the western region. This allows for improved preventive health measures and control strategies to prevent diseases and increase epidemiological surveillance.RESUMEN La resistencia antimicrobiana (RAM) es una preocupación mundial y una amenaza para la salud pública global. Por otra parte, Escherichia coli ha marcado una forma significativa en la evolución de la RAM. El presente estudio tuvo como objetivo caracterizar el patrón espacial de la RAM en aislados extraintestinales de E. coli procedentes de aves comerciales de provincias occidentales de Cuba. Los datos del estudio abarcaron de enero del 2014 a diciembre del 2017. El análisis de tendencias y la descripción exploratoria se realizó con el lenguaje de programación de R versión 4.0.4. Para el análisis espacial se utilizó ArcGIS 10.4 mediante el método de estimación de densidad de Kernel y salida cartográfica. Se observaron tendencias al incremento en la frecuencia de resistencia durante el periodo de estudio. La densidad de Kernel indicó que la RAM se distribuyó espacialmente en toda la región geográfica de estudio, aunque la mayor densidad (valores altos) de RAM se localizó mayoritariamente en municipios de la provincia Artemisa. Se identificaron áreas de riesgo significativamente mayor y menor de RAM en el Sudeste y Norte de la región, respectivamente. Por último, la identificación de la distribución espacial y la superficie de riesgo relativo de resistencia antimicrobiana de E. coli procedente de granjas avícolas en Cuba es un paso importante que contribuye a optimizar las prácticas de administración de antimicrobianos en la región occidental. Esto permite mejorar las medidas sanitarias preventivas y las estrategias de control para evitar enfermedades y aumentar la vigilancia epidemiológica.
       
  • Introduction of the first genetic nucleus of Murciano-Granadina goats in
           Cuba

    • Abstract: RESUMEN La importación de animales puede exponer al patrimonio zootécnico autóctono susceptible a patógenos si no se maneja apropiadamente este riesgo en los animales importados. La combinación del análisis de riesgo, el diagnóstico y facilidades de cuarentena suele ser la principal estrategia para mitigar tal riesgo. El objetivo del presente trabajo fue asegurar, desde el punto de vista sanitario, la introducción del primer núcleo genético de cabras de la raza Murciano-Granadina en Cuba. Para ello se compatibilizaron requisitos sanitarios entre las Autoridades Veterinarias del exportador y el receptor, se efectuaron pruebas diagnósticas preembarque y una vez trasladados hasta Cuba se mantuvieron en una unidad de cuarentena por 60 días durante los cuales se les practicaron otras investigaciones. Las pruebas diagnósticas en origen y destino no evidenciaron presencia de infección activa. La viabilidad de las cabras importadas se preservó de forma efectiva en la unidad de cuarentena hasta su traslado a post-cuarentena. Se logró un nivel de riesgo aceptable para la liberación del núcleo de cabras Murciano-Granadinas para su uso en el programa genético de desarrollo de la especie, lo cual se ha validado después de un año de los animales en post-cuarentena con buen desempeño productivo sin incidencias de salud relevantes.ABSTRACT Animal imports increase the risk of exposure of local or susceptible livestock to pathogens if the risk in imported animals is not properly managed. The combination of risk analysis, diagnosis and quarantine facilities is often the main strategy to mitigate such risk. The aim of this work was to ensure, from the sanitary point of view, the introduction of the first genetic nucleus of Murciano-Granadina goats in Cuba. To this end, sanitary requirements were harmonized between the Veterinary Authorities of exporter and recipient countries. Pre-shipment diagnostic tests were carried out and, once transported to Cuba, they were kept in a quarantine unit for 60 days during which time further research was carried out. Diagnostic testing at origin and destination showed no evidence of active infection. Viability of the imported goats was effectively preserved in the quarantine unit until their transfer to post-quarantine. There was an acceptable level of risk reached for the release of Murciano-Granadina goat nucleus for use in the Genetic Development Program of the species, which has been validated after animals have been in post-quarantine conditions for one year, showing good productive performance with no relevant health incidences.
       
  • Isolation and identification of bluetongue virus by first time in Cuba

    • Abstract: RESUMEN La lengua azul (LA) es una enfermedad viral que afecta a los rumiantes domésticos y salvajes. El agente etiológico de esta enfermedad es el virus de la lengua azul (VLA) que se transmite principalmente por vectores hematófagos del género Culicoides y tiene una distribución global. Cuba se encuentra en una zona de circulación endémica del virus y a pesar que desde el año 2007 se reporta a la Organización Mundial de la Sanidad Animal (OMSA) la presencia de bovinos seroreactores, no existen evidencias de manifestaciones clínicas de la enfermedad ni se ha aislado el virus. El objetivo del presente trabajo fue aislar e identificar el virus de la lengua azul a partir de la sangre de un ternero naturalmente infectado de la provincia Mayabeque en 2018. El virus fue aislado en huevos embrionados de pollo y en cultivo celular a partir de la sangre del ternero a los 21 días de edad que resultó positiva a la presencia de virus por un ensayo de reverso transcripción acoplada a la reacción en cadena de la polimerasa anidada (nRT-PCR). Los embriones inoculados mostraron mortalidad embrionaria, disminución de la talla, coloración rojiza y/o edema como indicativo de multiplicación viral. En el cultivo celular se observaron focos de células redondeadas y refráctiles. La identificación del virus se realizó por los ensayos de nRT-PCR, un Kit comercial de RT-PCR en tiempo real (rRT-PCR) y rRT-PCR basado en SYBR Green-I para la detección especifica del VLA.ABSTRACT Bluetongue (BT) is a viral disease that affects domestic and wild ruminants. The etiological agent of this disease is bluetongue virus (BTV) which is mostly transmitted by blood-borne vectors of the Culicoides genus and has a global distribution. Cuba is located in a zone of endemic circulation of the virus. Although the presence of bovine reactors has been reported to the World Organization for Animal Health (WOAH) since 2007, there is no evidence of clinical manifestations of the disease and the virus has not been isolated. This work aimed to isolate and identify bluetongue virus from the blood of a naturally infected calf from Mayabeque province in 2018. The virus was isolated in chicken embryonated eggs and in cell culture from the blood of the calf at 21 days of age, which tested positive for the presence of virus by a nested reverse transcription polymerase chain reaction assay (nRT-PCR). The inoculated embryos showed embryonic mortality, decreased size, reddish coloration and/or edema as indicative of viral multiplication. In cell culture, rounded and refractile cell foci were observed. Virus identification was performed by nRT-PCR assays, a commercial real-time RT-PCR kit (rRT-PCR) and rRT-PCR based on SYBR Green-I for specific detection of BTV.
       
  • XIII Meeting of Editors of Scientific and Informative Journals

    • Abstract: RESUMEN La lengua azul (LA) es una enfermedad viral que afecta a los rumiantes domésticos y salvajes. El agente etiológico de esta enfermedad es el virus de la lengua azul (VLA) que se transmite principalmente por vectores hematófagos del género Culicoides y tiene una distribución global. Cuba se encuentra en una zona de circulación endémica del virus y a pesar que desde el año 2007 se reporta a la Organización Mundial de la Sanidad Animal (OMSA) la presencia de bovinos seroreactores, no existen evidencias de manifestaciones clínicas de la enfermedad ni se ha aislado el virus. El objetivo del presente trabajo fue aislar e identificar el virus de la lengua azul a partir de la sangre de un ternero naturalmente infectado de la provincia Mayabeque en 2018. El virus fue aislado en huevos embrionados de pollo y en cultivo celular a partir de la sangre del ternero a los 21 días de edad que resultó positiva a la presencia de virus por un ensayo de reverso transcripción acoplada a la reacción en cadena de la polimerasa anidada (nRT-PCR). Los embriones inoculados mostraron mortalidad embrionaria, disminución de la talla, coloración rojiza y/o edema como indicativo de multiplicación viral. En el cultivo celular se observaron focos de células redondeadas y refráctiles. La identificación del virus se realizó por los ensayos de nRT-PCR, un Kit comercial de RT-PCR en tiempo real (rRT-PCR) y rRT-PCR basado en SYBR Green-I para la detección especifica del VLA.ABSTRACT Bluetongue (BT) is a viral disease that affects domestic and wild ruminants. The etiological agent of this disease is bluetongue virus (BTV) which is mostly transmitted by blood-borne vectors of the Culicoides genus and has a global distribution. Cuba is located in a zone of endemic circulation of the virus. Although the presence of bovine reactors has been reported to the World Organization for Animal Health (WOAH) since 2007, there is no evidence of clinical manifestations of the disease and the virus has not been isolated. This work aimed to isolate and identify bluetongue virus from the blood of a naturally infected calf from Mayabeque province in 2018. The virus was isolated in chicken embryonated eggs and in cell culture from the blood of the calf at 21 days of age, which tested positive for the presence of virus by a nested reverse transcription polymerase chain reaction assay (nRT-PCR). The inoculated embryos showed embryonic mortality, decreased size, reddish coloration and/or edema as indicative of viral multiplication. In cell culture, rounded and refractile cell foci were observed. Virus identification was performed by nRT-PCR assays, a commercial real-time RT-PCR kit (rRT-PCR) and rRT-PCR based on SYBR Green-I for specific detection of BTV.
       
  • Mollicutes associated with mastitis in dairy cattle herds in
           Zamora-Chinchipe province, Ecuador

    • Abstract: RESUMEN El crecimiento de la población mundial demanda disponibilidad de suficientes alimentos nutritivos e inocuos, y la mastitis bovina es una enfermedad que aún causa grandes pérdidas económicas, además de otros riesgos a la salud de los rebaños y el público en general, pese a los avances tecnológicos y la profundización en el conocimiento de factores decisivos en su comportamiento, dependientes tanto de los hospederos, como de los patógenos involucrados y del ambiente donde su interación tiene lugar. Para profundizar en la asociación de Mollicutes, en los procesos de mastitis en Zamora-Chinchipe se investigaron 386 vacas, de 99 rebaños, de las que 126 resultaron positivas (32,6 %) mediante Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), en tanto 340 (88,1 %) se constataron con mastitis subclínica mediante Prueba de California para mastitis. Aunque no se evidenció Mycoplasma bovis, otros micoplasmas también patogénicos pudieron estar presentes y complicar la recuperación de los rebaños afectados por la reconocida resistencia de estos microorganismos a la antibioterapia tradicional, entre otros peligros. La no asociación entre los resultados de los métodos de diagnóstico empleados evidenció que otros patógenos estuvieron involucrados en el mosaico etiológico de la mastitis en la provincia y reveló la necesidad de su indispensable profundización para orientar adecuadamente las estrategias de control.ABSTRACT World population growth demands availability of sufficient nutritious and healthy food. Bovine mastitis is a disease that still causes great economic losses, besides other risks to the health of herds and people in general, in spite of the technological advances and the deepening of the knowledge of crucial factors in its behavior, which depend on the hosts and pathogens involved and the environment where they interact.To further research Mollicutes association with mastitis disease in Zamora-Chinchipe province, 386 cows from 99 herds were tested. From them, 126 were positive to Mollicutes (32.6 %) by Polymerase Chain Reaction (PCR), while 340 (88.1 %) were found to have subclinical mastitis by California Mastitis Test. Although Mycoplasma bovis was not detected, other pathogenic mycoplasmas could also be present affecting the recovery of the infected herds due to the recognized resistance of those microorganisms to the traditional antibiotic therapy, among other risks. The lack of association among the results of the diagnostic methods used showed that other pathogens were involved in mastitis etiology and revealed the need for further studies in order to adequately guide control strategies.
       
  • Risk factors of mastitis associated with Mollicutes in dairy herds in
           Zamora-Chinchipe province, Ecuador

    • Abstract: RESUMEN La mastitis bovina es un desafío sanitario y económico para la producción animal, no solo porque afecta la salud y bienestar de los animales, sino también por la amenaza que representa para la salud pública, sin descontar las pérdidas millonarias que ocasionan los costos de tratamiento y el descarte de leche, un alimento por demás imprescindible para una población en plena expansión a nivel global. En Zamora-Chinchipe se demostró previamente Mollicutes en leche de tanque y vacas individuales. Para analizar los factores de riesgo asociados a esta problemática se aplicaron cuestionarios semi-estructurados a los rebaños previamente investigados. Las variables con p-valor<0,2 en el análisis univariado se seleccionaron e incluyeron en el modelo multivariado respectivo, que finalmente se ajustó manualmente mediante el procedimiento de eliminación hacia atrás (backward) para retirar las variables no significativas (p<0,05). Son factores de riesgo de Mollicutes en los rebaños un número mayor de categorías zootécnicas en la finca (RP=1,691; IC95%: 1,293 - 2,210), la presencia de ganado Holstein (RP=15,89; 1,44 - 175,45), fuentes de abasto de agua diferentes al acueducto (río, pozo, presa) (RP=4,37; 1,306 - 14,620) y las fincas que compran animales dentro de la misma provincia (RP=4,28; 1,416 - 12,939). En tanto, el lavado de las manos del ordeñador entre vacas o entre grupos mostró una prevalencia 57% y 67,6% menor, respectivamente, que en hatos donde esta medida no se cumple. Además, el secado de los cuartos con papel previo al ordeño (prevalencia 69,6% menor) es también un factor de protección de Mollicutes en vacas individuales.ABSTRACT Bovine mastitis is a sanitary and economic challenge for animal production, not only because it affects animal health and welfare, but also because of the threat it represents to public health, as well as the millions of losses caused by treatment costs and the milk discarded, indispensable food to the expanding population globally. Mycoplasma spp. were previously identified in tank milk and individual cows in Zamora-Chinchipe province. To analyze the risk factors associated with this problem, semi-structured questionnaires were applied to the herds previously tested. The variables with p-valor<0,2 in regression analysis were selected and included in the multivariate model, finally handle adjusted by backward procedure elimination variables with no significance (p<0,05). The risk factors for mollicutes in herds were the higher quantity number of zoothecnic categories (RP=1,691, IC95%: 1,293 – 2,210), the presence of Holstein race (RP=15,89; 1,44 – 175,45), no drinkable water use (RP=4,37; 1,306 – 14,620) and animal purchase into the province (RP=4,28; 1,416 – 12,939). Meanwhile, hand washing by the milker between cows or between groups showed a 57% and 67.6% lower prevalence, respectively, compared to herds where this practice is not followed. Additionally, drying the udders with paper before milking (with a 69.6% lower prevalence) is also a protective factor against Mollicutes in individual cows.
       
  • IV International Seminar on Animal and Plant Health (SISA 2023)

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  • Detection of multidrug-resistant Streptococcus equi subsp.
           zooepidemicus in Cuba

    • Abstract: ABSTRACT Streptococcus equi subsp. zooepidemicus (S. zooepidemicus) is an opportunistic pathogen capable of causing various infections in the respiratory, genital, and urinary tracts of horses and other animals. This species is considered responsible for many emerging zoonotic diseases. There has been an increasing circulation of multidrug-resistant S. zooepidemicus strains in horses, however, there is no information on S. zooepidemicus and its antimicrobial susceptibility profile in Cuban horses. Therefore, the objectives of this study were to report the isolation of S. zooepidemicus in a horse and to determine its antimicrobial susceptibility profile. A mare with pale mucous membranes, owned by a private producer in Melena del Sur, Mayabeque, was sampled, and a swab was taken from the genital tract. The isolate obtained was identified using the analytical profile index and mass spectrometry. The minimal inhibitory concentration (MIC) of 11 antibiotics (penicillin G, ampicillin, amoxicillin-clavulanate, cefquinome, imipenem, gentamicin, enrofloxacin, doxycycline, erythromycin, chloramphenicol, and vancomycin) was determined for the isolate. The isolate was identified as S. zooepidemicus and it was susceptible to all β-lactam, erythromycin, chloramphenicol, and vancomycin. The isolate presented a multidrug resistance profile to gentamicin, enrofloxacin, and doxycycline with MIC values of 16 μg/mL, 2 μg/mL, and 2 μg/mL, respectively. For the first time in Cuba, multidrug-resistant S. zooepidemicus was detected in the genital mucosa of a mare. The close interaction between humans and horses increases the risk of acquiring these multiresistant microorganisms or favoring their dissemination, thus this result should be considered in staff training.RESUMEN Streptococcus equi subsp. zooepidemicus (S. zooepidemicus) es un patógeno oportunista capaz de causar diversas infecciones en los tractos respiratorio, genital y urinario en caballos y otros animales. Esta especie se considera responsable de muchas enfermedades zoonóticas emergentes. Recientemente, existe una creciente circulación de cepas de S. zooepidemicus multirresistentes a antimicrobianos en caballos, sin embargo, no existe información sobre S. zooepidemicus y su perfil de susceptibilidad a antimicrobianos, en caballos cubanos. Por tanto, los objetivos de este estudio fueron reportar el aislamiento de S. zooepidemicus en un caballo y determinar su perfil de susceptibilidad a antimicrobianos. Se muestreó una yegua perteneciente a un productor privado de Melena del Sur, Mayabeque, con mucosas pálidas y se tomó un hisopado del tracto genital. El aislado obtenido se identificó mediante el índice de perfil analítico y espectrometría de masas. Se determinó la concentración mínima inhibitoria (CMI) de 11 antibióticos (penicilina G, ampicilina, amoxicilina-clavulanato, cefquinoma, imipenem, gentamicina, enrofloxacina, doxiciclina, eritromicina, cloranfenicol y vancomicina) para el aislado. El aislado se identificó como S. zooepidemicus y fue sensible a todos los betalactámicos, eritromicina, cloranfenicol y vancomicina. Presentó un perfil de multirresistencia a gentamicina, enrofloxacina y doxiciclina con valores de CMI de 16 μg/mL, 2 μg/mL y 2 μg/mL, respectivamente. Por primera vez en Cuba se detecta S. zooepidemicus multirresistente a antimicrobianos en la mucosa genital de una yegua. La estrecha interacción entre humanos y caballos, aumenta el riesgo de adquirir estos microorganismos multirresistentes o favorecer su diseminación, por lo que este resultado debe ser considerado en la capacitación del personal con vínculo ocupacional.
       
  • Safety and immunogenicity in piglets of the vaccine candidate E2-CD154, a
           subunit vaccine against classical swine fever. Results from phase III
           clinical trial

    • Abstract: ABSTRACT E2-CD154 is a subunit vaccine candidate that has been proven to be safe and to protect piglets from classical swine fever (CSF). In this study, those previous findings were confirmed and extended to a larger number of animals in a phase III clinical trial conducted on two production farms in Pinar del Río province. All animals in both farms were vaccinated with two doses of E2-CD154 on days 0 and 21. The study extended up to 60 weeks. The vaccine was well tolerated in piglets between 15 and 28 days of life, with neither local nor systemic side effects documented. Immunized pregnant sows were capable of transmitting high levels of maternally-derived neutralizing antibodies (MDNAs) to their offspring (Unit A, geometric mean titer = 1:1295, minimum value 1:100 and Unit B geometric mean titer = 1:474, minimum value 1:150), well above the protection threshold (1:50). These high MDNA titers in the piglets did not interfere with the immunogenicity of the candidate. All vaccinated piglets evaluated at random (more than 10% of 2804 vaccinated) developed protective neutralizing antibody titers higher than 1:400 at the four time points analyzed (nine, 21, 41, and 44 weeks) in both farms. The results of this study confirm the safety, immunogenicity and robustness of this vaccine candidate in this sensitive pig category in the field.RESUMEN El candidato vacunal E2-CD154 es una vacuna de subunidad cuya seguridad y capacidad protectora en crías frente a la peste porcina clásica ha sido demostrada en estudios previos. Esos hallazgos se confirman en el presente estudio de fase III realizado en dos unidades de producción porcina en la provincia de Pinar del Rio con un número mayor de animales. Todos los animales en ambas granjas recibieron dos dosis de E2-CD154 los días 0 y 21. El estudio se extendió por 60 semanas, la vacuna fue bien tolerada en las crías vacunadas entre los 15 y 28 días de edad, no se documentaron efectos adversos locales o sistémicos. Las cerdas gestantes inmunizadas fueron capaces de trasmitir altos títulos de anticuerpos a sus crías (Unidad A, media geométrica = 1:1295, valor mínimo 1:100 y Unidad B, media geométrica = 1:474, valor mínimo 1:150), muy por encima del umbral de protección (1:50). Estos elevados títulos de anticuerpos neutralizantes derivados de la madre no interfirieron con la inmunogenicidad del candidato vacunal en estudio. Todas las crías vacunadas estudiadas al azar (más del 10% de las 2804) desarrollaron títulos de anticuerpos neutralizantes mayores de 1:400 en los cuatro muestreos realizados (nueve, 21, 41, y 44 semanas) en ambas granjas. Los resultados de este estudio confirman la seguridad, inmunogenicidad y robustez del candidato vacunal en esta sensible categoría en condiciones de campo.
       
  • Antibacterial activity of silver nanoparticles from Leea coccinea leaves
           on Staphylococcus aureus

    • Abstract: RESUMEN Las infecciones ocasionadas por Staphylococcus aureus constituyen una problemática para la salud animal y humana. El objetivo de este trabajo fue determinar la concentración mínima inhibitoria (CMI) y la concentración mínima bactericida (CMB) de nanopartículas de plata (NpAg) obtenidas por síntesis verde con extracto de hojas de Leea coccinea sobre cepas de Staphylococcus aureus y aislados resistentes a meticilina. Se evaluaron tres lotes de NpAg de Leea coccinea sobre dos cepas S. aureus y dos aislados resistentes a meticilina, por el método de diluciones seriadas, para la determinación de CMI y CMB. Las NpAg de Leea coccinea mostraron actividad antibacteriana sobre las cepas y los aislados resistentes de S. aureus, con valores de CMI para los tres lotes que coincidieron en su mayoría en 0,03 mg/mL para todas las cepas y los aislados. En los valores de CMB en los tres lotes concordaron y se observaron diferencias entre los valores para los aislados resistentes (0,485 mg/mL) y las cepas (0,12 mg/mL). Estos resultados demuestran la actividad antibacteriana de las NpAg de Leea coccinea sobre este patógeno, destacan sus potencialidades como alternativa ante la resistencia a antibióticos y crean las bases para otros estudios con vista a una futura aplicación como antibacteriano.ABSTRACT Infections caused by Staphylococcus aureus represent a problem for animal and human health. This work was aimed to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of silver nanoparticles (NpAg) obtained by green synthesis with Leea coccinea leaf extract on Staphylococcus aureus strains and methicillin resistant isolates. Three batches of NpAg from Leea coccinea were evaluated on two S. aureus strains and two methicillin resistant isolates, by the serial dilution method, for MIC and MBC determination. NpAg from Leea coccinea showed antibacterial activity against resistant strains and isolates of S. aureus, with MIC values for the three batches mostly coinciding at 0.03 mg/mL for all the strains and isolates. MBC values in the three batches agreed and differences were observed between the values for resistant isolates (0.485 mg/mL) and strains (0.12 mg/mL). These results demonstrate the antibacterial activity of NpAg from Leea coccinea on this pathogen, demonstrating its potential as an alternative to antibiotic resistance and creating the basis for further studies for its application as an antibacterial agent.
       
  • SYBR Green-based real-time PCR assay for the detection of porcine epidemic
           diarrhea virus

    • Abstract: RESUMEN La diarrea epidémica porcina (DEP) es una enfermedad contagiosa producida por el virus del mismo nombre que es clasificado dentro del género Alphacoronavirus, familia Coronaviridae. Este virus produce diarrea, vómitos y pérdida de peso en cerdos de todas las edades, pero en los cerditos neonatos alcanza una morbilidad y mortalidad de hasta el 100%. En Ecuador, fue diagnosticada por primera vez en el 2014 mediante PCR convencional o en punto final. Actualmente existe la necesidad de contar con un ensayo ultrasensible, específico, que permita trabajar un gran número de muestras para facilitar la vigilancia epidemiológica de nuevos brotes y detectar animales portadores. Se desarrolló y evaluó un ensayo de PCR en tiempo real con un colorante intercalador de ADN como el SYBR Green para detectar el virus de la DEP (VDEP) en heces de cerdos, con cebadores que tienen como diana el gen N del virus. En la evaluación de la sensibilidad analítica se utilizó un patrón de ARN del VDEP sintetizado en el laboratorio, determinándose que el límite de detección del ensayo desarrollado fue de 4 copias de ARN del VDEP, comparando con la PCR en punto final que fue 100 veces más sensible, la especificidad del ensayo se basó en la posibilidad de detectar falsos positivos mediante la curva de disociación. Los valores de Ct (valor umbral) en el análisis intra e inter-ensayo mostraron coeficientes de variación válidos. En la evaluación del desempeño diagnóstico, el ensayo detectó 18 muestras positivas de un total de 52 para un 100% de concordancia con el PCR en punto final. Se concluye que el ensayo de PCR en tiempo real con SYBR Green desarrollado es altamente sensible, específico, reproducible y rápido para el diagnóstico del VDEP en homogenados de mucosa intestinal de cerdos.ABSTRACT Porcine epidemic diarrhea (PED) is a contagious disease caused by its virus, classified within the genus Alphacoronavirus, family Coronaviridae. This virus causes diarrhea, vomiting and weight loss in pigs of all ages, especially in neonatal piglets, with morbidity and mortality of up to 100%. In Ecuador, the disease was diagnosed for the first time in 2014 by conventional or endpoint PCR. Currently, there is a need for an ultrasensitive and specific assay, which allows working a large number of samples to facilitate epidemiological surveillance of new outbreaks and detect carrier animals. A real-time PCR assay intercalating DNA dyes such as SYBR Green was developed and assessed to detect PED virus (PEDv) in swine feces with primers targeting the N-gene of the virus. A PEDv RNA standard synthesized in the laboratory was used in the assessment of the analytical sensitivity. The detection limit of the developed assay was determined to be 4 copies of PEDv RNA, compared to endpoint PCR which was 100 times more sensitive. Assay specificity was based on the possibility of detecting false positives using the melting curve. Cycle threshold (Ct) values in intra- and inter-assay analysis showed valid coefficients of variation. When assessing diagnostic performance, the assay detected 18 positive samples out of a total of 52 for 100 % agreement with the endpoint PCR. It is concluded that the developed SYBR Green-based real-time PCR assay is highly sensitive, specific, reproducible and rapid for the detection of PEDv in swine intestinal mucosa homogenates.
       
 
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