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ISSN (Print) 1010-2752 - ISSN (Online) 2224-4697
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  • Tabaquina, an alternative for the management of Tarophagus colocasiae
           Matzumura (Auchenorhyncha: Delphacidae)

    • Abstract: RESUMEN Este estudio tuvo como objetivo determinar la efectividad técnica de la tabaquina frente a Tarophagus colocasiae en condiciones de laboratorio y de campo. En el primer experimento se utilizaron ninfas y adultos de T. colocasiae, procedentes de una cría de laboratorio. El ensayo de campo se desarrolló en una plantación del Instituto de Investigaciones de Viandas Tropicales (INIVIT), con alto porcentaje de infestación por el insecto. Se utilizó una solución de tabaquina, obtenida a partir de palillos de tabaco, macerados en agua durante 24 horas. Se evaluó el número de insectos muertos a las 24, 48 y 72 horas, y se determinó el porcentaje de efectividad técnica mediante la fórmula de Abbot. En condiciones de laboratorio, el porcentaje de efectividad técnica fue superior a 95 % a las 24 horas, tanto en ninfas como en adultos, sin diferencias significativas entre ambos estados de desarrollo. En condiciones de campo, el porcentaje de efectividad superó el 75 % a las 24 horas de aplicado el producto, con diferencias significativas respecto a los controles utilizados. Tanto en condiciones de laboratorio como de campo, el mayor número de insectos muertos se observó a las 24 horas.ABSTRACT The objective of this study was to determine the technical effectiveness of tabaquina against Tarophagus colocasiae under laboratory and field conditions. In the first experiment, nymphs and adults from T. colocasiae reared in the laboratory were used. The field test was carried out in a plantation with a high percentage of insect infestation at INIVIT. It was used a tabaquina solution obtained from tobacco sticks, macerated in water during 24 hours. The dead insect numbers were evaluated at 24, 48, and 72 hours, and the percentage of technical effectiveness was determined using Abbot's formula. Under laboratory conditions, the percentage of technical effectiveness was higher than 95 % at 24 hours, both in nymphs and adults, without significant differences between the two stages of development. Under field conditions, the effectiveness percentage 24 hours after the product application exceeded 75 %, with significant differences with respect to the controls used. In both, laboratory and field conditions, the greatest number of dead insects was observed at 24 hours.
       
  • Reaction of sugarcane cultivars to Puccinia kuehnii in Mayabeque
           for seven years

    • Abstract: RESUMEN El objetivo de este trabajo fue determinar la reacción de cultivares de caña de azúcar ante la roya naranja en la Estación Territorial de Investigaciones de la Caña de Azúcar Mayabeque-Artemisa, en el periodo 2012-2018. La evaluación de la enfermedad se realizó de forma, visual en las hojas, cada seis meses y se diagnosticó por microscopia óptica. Las uredosporas se caracterizaron en cuanto a color, forma y tamaño. Los individuos se agruparon según la presencia de pústulas en las hojas 0 y +1, así como el porcentaje de superficie ocupada por esta. La reacción de los individuos ante el hongo se determinó en la hoja + 3 en diez plantas. Existe una ligera tendencia al aumento de los cultivares comerciales y clones de caña de azúcar infectados con el hongo. La enfermedad se manifestó con mayor severidad en los años 2015 y 2016. Mostraron resistencia 13 cultivares comerciales (C86-56, C132-81, C334-64, C137-81, C88-380, B80250, B78503, C98-128, C98-129, C86-251, C90-469, C1051-73 y C90-317). Seis presentaron síntomas (C85-1, C88-523, C95-416, PR980, C89-559 y C89-147); mientras que, tres (Co997, CP52-43 y C87-51) manifestaron inestabilidad en su comportamiento. Las diferencias en el comportamiento de Puccinia kuehnii en los siete años de estudio indican una expresión diferencial en la interacción hospedante-patógeno-ambiente.ABSTRACT The objective of this work was to determine the reaction of sugarcane cultivars to orange rust at the Mayabeque-Artemisa Sugarcane Territorial Research Station in the 2012-2018 period. The disease evaluation was visually performed on the leaves every six months and diagnosed by optical microscopy. Uredospores were characterized by their color, shape and size. The individuals were grouped according to the presence of pustules on leaves 0 and +1, as well as the percentage of surface occupied by them. The reaction of the individuals to the fungus was determined on the leaf + 3 in ten plants. The commercial cultivars and sugarcane clones infected with the fungus had a slight tendency to increase. The disease manifestation was more severe in 2015 and 2016. Resistance to the disease was shown by 13 commercial cultivars (C86-56, C132-81, C334-64, C137-81, C88-380, B80250, B78503, C98-128, C98- 129, C86-251, C90-469, C1051-73, and C90-317). Six cultivars (C85-1, C88-523, C95-416, PR980, C89-559, and C89-147) displayed symptoms, whereas three of them (Co997, CP52-43, and C87-51) manifested instability in their behavior. Differences in the behavior of Puccinia kuehnii in the seven years of study indicate a differential expression in the host-pathogen-environment interaction.
       
  • Speckle by Corynespora torulosa (Syd.) Crous: a pre-harvest fruit disease
           of Musa spp. in Cuba

    • Abstract: ABSTRACT It was studied the etiology of a fruit disease spots in form of a speckling of Cavendish banana fruits that causes fruit quality deterioration and commercial rejection. For this purpose, peel spots were placed in humid chambers to incite fungal development, and isolations were carried out on water agar + streptomycin. To fulfill Koch postulates, CEMSA 3/4 and Burro CEMSA fruits were inoculated with a spore suspension of 1x105 conidia/ml and incubated at room temperature under high relative humidity. Fruits of Cavendish and Gros Michel (AAA), CEMSA 3/4 and Pisang ceylan (AAB), Pisang awak and Burro CEMSA (ABB) were inoculated as described. The fungus Corynespora torulosa (Syd) Crous, comb. new (syn. Deightoniella torulosa (Syd.), M.B. Ellis) was uniformly recovered from the humid chambers and isolations. The artificial inoculations of Cavendish fruits with the isolates obtained reproduced the speckling symptoms, and C. torulosa was confirmed as the causal agent of speckling. All varieties inoculated showed to be susceptible to the pathogen. It is the first time that C. torulosa is described in Cuba as the causal agent of fruit speckling previously attributed to other causes. C. torulosa is a colonizer of senescent leaves, fruit flowers, and bracts of Musa plants and becomes airborne during appropriate environmental conditions. It is discussed that sanitation of senescent leaves and fruits organs are essential to reduce incidence of the disease.RESUMEN Se estudió la etiología de una enfermedad de los frutos en forma de punteado en frutos de bananos Cavendish que causa deterioro y rechazo comercial de frutos. Se colocaron manchas de la piel de los frutos en cámara húmeda para incitar el desarrollo de hongos y se realizaron aislamientos en agar agua + estreptomicina. Para cumplimentar los postulados de Koch, se inocularon frutos de CEMSA 3/4 y Burro CEMSA con una suspensión de 1x105 conidios/ml y se incubaron a temperatura ambiente y alta humedad relativa. Se inocularon frutos de Cavendish y Gros Michel (AAA), CEMSA – y Pisang ceylan (AAB), Pisang awak y Burro CEMSA (ABB) de la forma ya descrita. De las cámaras húmedas y aislamientos se recobró uniformemente el hongo Corynespora torulosa (Syd) Crous, comb. new (syn. Deightoniella torulosa (Syd.), M.B. Ellis). Las inoculaciones artificiales de los frutos de CEMSA 3/4 y Burro CEMSA con los aislamientos obtenidos, reprodujeron el punteado de los síntomas y se confirmó que C. torulosa es el agente causal del punteado de los frutos. Todas las variedades inoculadas mostraron ser susceptibles al patógeno. Esta es la primera confirmación en Cuba de que C. torulosa es el agente causal del punteado de los frutos, antes atribuido a otras causas. C. torulosa es un colonizador de hojas senescentes, flores y brácteas de plantas de Musa spp. Se discute que el saneamiento de hojas viejas, y órganos de los racimos es esencial para reducir la incidencia de la enfermedad.
       
  • Effect of abiotic factors on viability and infectivity of Heterorhabditis
           amazonensis Andaló et al. strain HC1

    • Abstract: RESUMEN El objetivo de este estudio fue determinar la influencia de tres factores abióticos sobre la viabilidad y patogenicidad de Heterorhabditis amazonensis Anadaló et al., cepa HC1, como estudios iniciales para la obtención de una formulación comercial. Se desarrollaron tres ensayos para determinar el efecto de tres tipos de agua diferentes (potable, hervida, destilada y desionizada), pH (5; 7 y 9) y rangos de temperaturas (22±1°C; 25±2°C; 27°C) sobre la viabilidad e infectividad de juveniles infectivos a los siete y 35 días. En el ensayo con los tipos de agua se utilizaron dos concentraciones de juveniles infectivos (JI): 5x104 y 105 JI por placa; los resultados se evaluaron a través de Análisis de Varianza bifactorial y prueba de rangos múltiples de Duncan (95 %). En los experimentos de pH y temperatura se presentan los resultados a los siete y 35 días, cuando se determinó viabilidad (%) e infectividad, medida a través del porcentaje de mortalidad de larvas de Galleria mellonella L. Los datos se procesaron mediante Prueba de Wald por corrección y se usó software CompaProWin 2.0. En ambas concentraciones, los mayores valores de viabilidad se obtuvieron cuando se empleó agua destilada. Entre 60 y 100 % de los JI sobrevivieron a los siete días en pH entre 5 y 9, con los mayores valores en pH 7; mientras que, a los 35 días, fue de 40 y 60 %. La temperatura fue el factor abiótico que más efecto negativo tuvo en la viabilidad e infectividad de la cepa. Este estudio evidenció que H. amazonensis cepa HC1, puede ser almacenada en formulaciones acuosas, en bandejas y esponjas, utilizando agua destilada con pH neutro y a temperaturas frescas de unos 22±1°C.ABSTRACT The objective of this study was to determine the influence of selected abiotic factors on the viability and pathogenicity of H. amazonensis strain HC1, as initial studies to obtain a commercial formulation. Three trials were developed, where infective juveniles (IJ) were maintained under the effect of each factor for several weeks. In the first test, it was evaluated the effect of different types of water (tap water, boiled, distilled and deionized) on JI at the concentrations of 5x104 and 105 IJ per plate (15 cm diameter). The data related to the viability of IJ were processed through the two-factor analysis of variance and the Duncan´s multiple range test (95 % significance level). Using the water type selected in the first test, three solutions at pH 5, 7, and 9 were prepared and evaluated at the temperatures of 22±1°C, 25±2°C, and 27°C. The values were processed by Wald's test by correction, and CompaProWin 2.0 software was used. The viability and infectivity of IJ in the temperature and pH tests were determined by using the one-in-one test with larvae of Galleria mellonella L. The highest survival values of IJ were obtained with distilled and boiled water, pH 5 and 7, and at temperatures of 22±1° C.
       
  • Evaluation of a non-radioactive dot-blot nucleic acid hybridization as a
           detection tool for citrus leaf blotch virus in Cuba

    • Abstract: ABSTRACT A non-radioactive dot-blot nucleic acid hybridization method was evaluated for detecting citrus leaf blotch virus (CLBV, Flexiviridae: Citrivirus) in total RNA extracts from kumquat trees. DNA fragments partially encompassing the open reading frames encoding the polymerase (RdRp) and the movement (MP coat (CP) proteins of CLBV were used to generate digoxigenin (DIG-11-dUTP) probes by PCR. Probes were individually generated using cloned DNA fragments of the Cuban CLBV isolate as templates. In the assays, several working conditions, including the use of different membranes, hybridization and washing buffers were tested. The method detected up to 40 pg of a plasmid containing the complete CLBV genome, as well as viral genomic sequences in RNA extracts of naturally infected trees of 'Nagami' kumquat (Fortunella margarita) and 'Round' kumquat (F. japonica). Results support considering the method developed an appropriated tool to be used after its validation by the programs of sanitation, quarantine, and certification of citrus propagation materials in Cuba.RESUMEN Se evaluó un método de hibridación de ácidos nucleicos no radioactivo en formato dot-blot para la detección precisa de citrus leaf blotch virus (CLBV: Citrivirus) en extractos de ARN totales de árboles de cítricos. Los fragmentos de ADN que conforman parcialmente los marcos de lectura abiertos que codifican la polimerasa (RdRp), la proteína de movimiento (MP) y la proteína de la cubierta (CP) de CLBV se utilizaron para generar sondas marcadas con digoxigenina (DIG-11-dUTP) mediante PCR. Para generar las sondas se utilizaron fragmentos de ADN clonados a partir del aislado de CLBV de Cuba. Se evaluaron varias condiciones de trabajo que incluyeron el uso de diferentes membranas, soluciones de hibridación y tampones de lavado. Con el método evaluado fue posible detectar hasta 40 pg de un plasmidio que contiene el genoma completo de CLBV, así como material genómico del virus en extractos de ARN de plantas de kumquat 'Nagami' (Fortunella margarita) y kumquat 'Round' (F. japonica) infectadas de forma natural con el virus. Los resultados evidenciaron que el método desarrollado es una herramienta útil y altamente recomendable, una vez sea validado, para su uso en los programas de saneamiento, cuarentena y certificación del material de propagación de cítricos en Cuba.
       
  • Commelina diffusa Burm. F., new host of Meloidogyne sp.
           in Cuba

    • Abstract: RESUMEN Fue objetivo de la presente investigación determinar la presencia de especies del género Meloidogyne, en plantas de Commelina diffusa Burm. F. El muestreo se realizó en la colección de germoplasma de Musa spp., ubicada en el Instituto de Investigaciones de Viandas Tropicales (INIVIT) (22, 35º N; 80, 13º O), Santo Domingo, Villa Clara, Cuba. Se tomaron muestras de plantas de C. diffusa, que presentaban raíces con agallamiento y se trasladaron al Laboratorio de Nematología Agrícola del Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria (CENSA). Bajo el microscopio estereoscópico se extrajeron 25 hembras adultas que se procesaron para obtener sus patrones perineales. Para el diagnóstico morfológico de las especies de Meloidogyne se emplearon las claves y descripciones de las especies de este género. Las raíces de C. diffusa presentaron numerosas agallas de diversos tamaños y se pudo verificar la presencia de hembras adultas bien formadas, con ootecas que contenían huevos, indicativo de la reproducción del nematodo en esta planta. Las características de los patrones perineales de las hembras extraídas sugirieron la presencia de la especie Meloidogyne arenaria (Neal) Chitwood, diagnóstico que se confirmará, en un estudio futuro, con el uso de técnicas de biología molecular.ABSTRACT The objective of this research was to determine the presence of Meloidogyne species in Commelina diffusa Burn.F. The sampling was made in the Musa germplasm collection kept at the National Institute of Tropical Roots and Tubers (INIVIT) (22.35º N; 80.13º W), Santo Domingo, Villa Clara Province, Cuba. Samples of C. diffusa plants with root galling were taken and carried to the Agricultural Nematology Laboratory at National Centre for Plant and Animal Health (CENSA). Twenty-five adult females were processed under a stereoscope to obtain the perineal patterns. Keys and descriptions of Meloidogyne species were used for their morphological diagnosis. The roots of C. diffusa showed numerous galls of different sizes, and, inside the galls, adult females with egg masses were observed indicating nematode reproduction on the plant. The characteristics of the perineal patterns of the extracted females suggested the presence of Meloidogyne arenaria (Neal) Chitwood, a diagnosis that must be confirmed in a future study using molecular tools.
       
  • Susceptibility of Cosmopolites sordidus (Germar) adults to Heterorhabditis
           amazonensis Andaló et al. strain HC1

    • Abstract: RESUMEN El objetivo de este estudio fue determinar la susceptibilidad in vitro de adultos del picudo negro (Cosmopolites sordidus Germar) a los juveniles infectivos (JI) de Heterorhabditis amazonenesis Andaló et al. (Cepa HC1). Los adultos colectados en campo con trampas Sándwich y de Disco Modificada, se mantuvieron en cuarentena en el laboratorio hasta su uso en los ensayos. Se prepararon suspensiones de juveniles infectivos (125, 250, 500, 2500, 5000 JI.ml-1) con las que se inocularon los insectos y se mantuvieron testigos sin inocular. Se evaluó la mortalidad desde las 12 horas hasta 21 días posteriores a la inoculación. Se determinaron los valores de Dosis letales (DL50, DL90) y Tiempos letales (DL50 y DL90) a través de Análisis Probi y el porcentaje de mortalidad a través del Análisis de Varianza. Por el efecto de los nematodos, los adultos de picudos muertos se ponen rígidos y duros, mantienen la coloración y encogen las patas. Las DL50 y DL90 determinadas fueron 1 872 y 6 061 JI/ml-1, respectivamente. Con la dosis de 5000 JI/ml-1 para el control del 50 y 90 % de una población de C. sordidus, los TLs estimados fueron 17 y 28 días, respectivamente. El mayor porcentaje de mortalidad fue 86,7 y a la dosis más alta, a los 21 días.ABSTRACT The objective of this study was to determine the in vitro susceptibility of weevil adults (Cosmopolites sordicus Germar) to infective juveniles (IJ) of Heterorhabditis amazonenesis Andaló et al. (Cuban strain HC1). The adults were collected in the field with sandwich and modified disc traps and kept in quarantine in the laboratory until their use in the tests. The insects were inoculated with suspensions of infective juveniles at the dosage of 125, 250, 500, 2500, and 5000 JI.ml-1. Controls without inoculation were included. Mortality was evaluated from 12 hours to 21 days after inoculation. Lethal dose values (LD50, DL90) and lethal times (LT50 and LT90) were determined through Probit Analysis and the percentage of mortality by performing an Variance Analysis. The weevil adults killed by the effect of the nematodes became stiff and hard, maintained coloration and shrank their legs. The LD 50 and LD 90 determined were 1872 and 6061 IJ / ml-1, respectively. The LT values estimated using the concentration of 5000 IJ / ml-1 for the control of 50 and 90 % of a population of C. sordidus were 17 and 28 days, respectively. The highest percentage of mortality was 86.7 using the highest dose at 21 days.
       
  • Characterization of a suburban vegetable producing farm and basic elements
           to consider for habitat management

    • Abstract: RESUMEN Este estudio se desarrolló con el objetivo de aportar al agricultor elementos importantes para las decisiones y la implementación de acciones que le permitirán la transformación de la finca a un sistema más sostenible. Se llevó a cabo la caracterización del espacio agrícola y las áreas circundantes de la Finca de producción suburbana “Las Piedras”, perteneciente a la provincia La Habana, Cuba. Se utilizaron herramientas de un Sistema de Información Geográfica como el Sistema de Posicionamiento Global (GPS), la fotografía aérea y los mapas temáticos, entre otros, estableciendo como referencia el área total de la finca, que incluyen las áreas cultivadas, colindantes y edificaciones. Se determinó la biodiversidad de la finca a través de una escala que permite clasificar cada indicador de la biodiversidad, así como el sistema de producción en el momento de la evaluación inicial. La finca fue clasificada como “medianamente compleja” a partir de los indicadores evaluados relacionados con la biodiversidad funcional, la biodiversidad introducida funcional y la biodiversidad auxiliar. De forma general, la caracterización de la finca demostró el uso insuficiente de rotaciones y asociaciones de cultivos, la escasa aplicación de controles biológicos, una disposición de los cultivos que propicia el incremento y la propagación de especies fitófagas comunes, la presencia de áreas desforestadas, poca disponibilidad de recursos florales para el refugio y la alimentación de enemigos naturales, así como la necesidad de sustituir las cercas y los postes vivos, aspectos que constituyen los elementos fundamentales para las recomendaciones del manejo del hábitat en la finca.ABSTRACT This work was developed with the objective of providing the farmer with important elements for decision making and the implementation of actions that allow the transformation of the farm to a more sustainable system. The characterization of the agricultural space and the surrounding areas of the suburban farm “Las Piedras” belonging to the province of Havana, Cuba, was carried out. Tools of a Geographic Information System were used such as the Global Positioning System (GPS), aerial photography and thematic maps, among others, establishing as reference the total area of the farm, which included cultivated areas, buildings and adjoining areas. Farm biodiversity was determined using a scale that allowed classification of each biodiversity indicator. At the initial evaluation, the production system was also determined. The farm was classified as "moderately complex" based on the evaluated indicators of functional biodiversity, introduced functional biodiversity, and auxiliary biodiversity, which were well below the values ​​that a highly complex farm can present. In general, the characterization carried out in the farm showed poor aspects such as insufficient use of rotations and crop associations, scarce application of biological controls, inappropriate disposition of the crops favoring the increase and propagation of common phytophagous species, areas deforested, lack of availability of floral resources for the refuge and feeding of natural enemies, and the need to replace fences and posts of living fences. These are aspects that constitute fundamental components of the recommendation for habitat management on the farm.
       
  • The introduction of glass cylinders and plastic nets in olfactometers
           facilitates the entomopathogenic nematode behaviour tests

    • Abstract: RESUMEN Se evaluó la adecuación de un olfatómetro, al que se le introdujeron un cilindro de vidrio y mallas plásticas para evitar el desplazamiento de las larvas del insecto diana a evaluar, permitiendo determinar la capacidad de desplazamiento e infección de los juveniles infectivos (JI) de nematodos entomopatógenos en experimentos en laboratorios. Para estos ensayos se utilizaron JI de la cepa HC1 de Heterorhabditis amazonensis Andaló et al., recién emergidos y con 100 % de viabilidad. Para el montaje del dispositivo de dos cámaras, se utilizaron partes de un olfatómetro de seis brazos, cilindros de vidrio, mallas plásticas y arena sílice esterilizada al vapor como sustrato con 10 % de humedad. Las larvas de último instar de Galleria mellonella (L.), utilizadas como insectos diana, procedían de una cría de laboratorio y tenían 200 mg de peso, aproximadamente. Al sustrato se le aplicó una suspensión que contenía 2000 JI en el extremo opuesto al tubo de PVC donde se situaron las larvas de G. mellonella; estas se mantuvieron en cilindros protegidos con malla plástica para evitar su desplazamiento. Se prepararon tres réplicas que se mantuvieron a 27°C. Se realizaron observaciones a las 24, 48 y 72 horas posteriores a la aplicación de los nematodos y se registró la mortalidad de las larvas. Con el ensayo del olfatómetro se comprobó la movilidad de los JI, los cuales recorrieron 19,5 cm en 60 horas. La mortalidad de las larvas de G. mellonella fue de 84,7 %. El olfatómetro de dos cámaras, con la introducción de cilindro de vidrio y malla plástica, resultó útil para los estudios del efecto de factores abióticos sobre el comportamiento de los nematodos entomopatógenos en el laboratorio.ABSTRACT It was evaluated the adequacy of an olfactometer, to which a glass cylinder and a plastic net were introduced to avoid displacement of the target insect larvae, allowing determining displacement and infection capacity of infective juveniles (IJ) of entomopathogenic nematodes in laboratories trials. For these assays, recently emerged IJ with 100 % viability of the strain HC1 of Heterorhabditis amazonensis Andaló et al. were used. For the assembly of the two branches device, some parts of a six arms olfactometer, glass cylinders, plastic meshes, and, as substrate, sterile silica sand with 10 % of humidity were used. The last instar larvae of Galleria mellonella (L.) use as the target insect came from a laboratory rearing and weighed about 200 mg. A 2000 IJ suspension was applied to the substrate on the end opposing to the PVC tube in which the G. mellonella larvae were kept in a glass cylinder protected with a plastic net to avoid their movement. Three replicas were kept at 27°C. Larval mortality was recorded at 24, 48, and 72 hours after nematode application. With the olfactometer assay, e it was checked mobility of IJ, which moved along 19.5 cm in 60 hours. Mortality of G. mellonella larvae reached 84.7 %. The two-branch olfactometer with the introduction of a glass cylinder and a plastic net, was useful for laboratory studies related to the effect of abiotic factor on entomopathogenic nematodes.
       
 
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